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Open Access A comparison of methods of inducing lachrymation and tear collection in chickens for detection of virus-specific immuoglobulins after infection with infectious bronchitis virus

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Four-week-old specific-pathogen-free chickens were infected with virulent infectious bronchitis virus Massachusetts strain M41 via the ocular–nasal route. At weekly intervals up to 3 weeks post-infection, excess lachrymation was induced either by placing sodium chloride (salt) crystals on the eyes or by intramuscular injection of carbachol. Tears were collected using micropipettes or on filter paper. Levels of virus-specific immunoglobulin (Ig)A and IgG were similar, irrespective of the method of tear induction. When tears were collected using filter papers, IgG was detected in eluted samples but at significantly lower levels than in those collected by pipette. Collection of IgA in this way was even less productive, and only trace amounts were detected. Possible reasons for these discrepancies have been discussed. Comparaison de méthodes induisant un larmoiement et permettant la récolte des larmes chez le poulet pour la détection des immunoglobulines spécifiques de virus après une infection par un virus de la bronchite infectieuse. Des poulets, indemnes de microorganismes pathogènes spécifiés, ont été infectés par la souche virulente Massachusetts M41 du virus de la bronchite infectieuse via la voie oculonasale. Toutes les semaines jusqu'à la troisième après l'infection, un excès de larmes a été induit soit en plaçant des cristaux de chlorite de sodium sur les yeux ou en injectant par voie intramusculaire du carbachol. Les larmes ont été récoltées en utilisant des micropipettes ou des filtres à papier. Les niveaux d'IgA et d'IgG spécifiques de virus ont été similaires, quelle que soit la méthode d'induction des larmes. Pour les larmes récoltées sur papier filtre, les IgG ont été détectées dans des échantillons élués mais à des niveaux significativement inférieurs à celles récoltées à l'aide de pipettes. La récolte des IgA de cette façon a été encore moins productive et seules quelques traces ont été détectées. Les raisons possibles pour ces divergences sont discutées. Ein Vergleich von Methoden zur Induktion der Tränensekretion und zur Tränensammlung bei Hühnern zum Nachweis virusspezifischer Immunglobuline nach Infektion mit dem Virus der infektiösem Bronchitis Vierwöchige spezifisch-pathogen freie Hühner wurden mit virulentem Massachusetts-Stamm M41 des Virus der infektiösen Bronchitis (IBV) via okulonasaler Route infiziert. In wöchentlichen Intervallen bis zur dritten Woche post infectionem wurde eine übermäßige Tränensekretion entweder durch Auflegen von NaCl (Salz)-Kristallen auf die Augen oder durch intramuskuläre Injektion von Carbachol induziert. Die Tränen wurden mittels Mikropipetten oder Filterpapier gesammelt. Der Level virusspezifischer IgA und IgG war unabhängig von der Methode der Träneninduktion ähnlich. Bei der Tränensammlung mit Hilfe von Filterpapier wurde IgG in den gelösten Proben nachgewiesen, jedoch mit signifikant geringeren Gehalten als in den mit der Pipette gesammelten. Die Sammlung von IgA auf diese Art war sogar noch weniger ergiebig, so dass nur Spuren des Immunglobulins nachgewiesen wurden. Die möglichen Gründe für diese Diskrepanzen werden diskutiert. Comparación de los métodos para inducir lagrimeo y recolección de lágrimas en pollos para detectar inmunoglobulinas virus-específicas tras la infección con virus de bronquitis infecciosa Pollos libres de patógenos específicos de cuatro semanas de edad fueron infectados con la cepa Massachusetts M41 de virus de bronquitis infecciosa virulento (IBV) por vía oculonasal. A intervalos semanales hasta las 3 semanas postinfección, se indujo el exceso de lagrimeo mediante la introducción de cristales de cloruro sódico (sal) en los ojos o mediante inyección intramuscular de carbacol. Se recogieron lágrimas mediante micropipetas o en papel de filtro. Los niveles de IgA e IgG virus específicas fueron similares, independientemente del método de inducción al lagrimeo. Cuando las lágrimas fueron recogidas mediante papeles de filtro, las IgG fueron detectadas en muestras eluidas, pero a niveles mucho menores que las recogidas con pipetas. La recolección de IgA de esta forma fue incluso menos productiva, y únicamente se detectaron cantidades mínimas. Se discuten las posibles razones de estas discrepancias.
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Document Type: Research Article

Affiliations: 1: Department of Veterinary Pathology, University of Liverpool, Leahurst, Neston, South Wirral, CH64 7TE, UK 2: Avian Enterprise (Europe), Merial Animal Health Ltd, Sandringham House, Harlow Business Park, Harlow, Essex, CM19 5TG, UK

Publication date: June 1, 2005

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