A rapid assay for detecting antibody against leucocytozoonosis in chickens with a latex agglutination test using recombinant R7 antigen

A method for detecting antibody against leucocytozoonosis in chickens by latex agglutination (LA) was developed using latex beads coated with recombinant R7 (rR7), an outer membrane antigen of second-generation schizonts of Leucocytozoon caulleryi . Compared with the agar gel precipitation test, which is widely used in Japan, LA could detect antibody induced by L. caulleryi infection with greater sensitivity. No agglutination was detected with sera from specific pathogen free or layer chickens that had not been vaccinated with oil-adjuvanted rR7 antigen, or infected with L. caulleryi , nor with sera from chickens inoculated with other pathogens, establishing the specificity of the assay. The LA test was also able to be used to quantify serum antibody induced by vaccination, which is not possible with the agar gel precipitation test. This study has shown that LA using the rR7 antigen is a simple, quick, and useful method for detecting antibody against L. caulleryi . Méthode rapide de détection des anticorps de la leucocytozoonose chez le poulet à l'aide d'un test d'agglutination au latex utilisant l'antigène recombinant R7 Une méthode rapide de détection des anticorps de la leucocytozoonose chez le poulet, à l'aide d'un test d'agglutination au latex (LA), a été développée en utilisant des billes de latex tapissées avec le recombinant R7 (rR7), un antigène de membrane externe de schizontes de seconde génération de Leucocytozoon caulleryi . Par comparaison au test de précipitation en milieu gélosé (AGP) qui est largement utilisé au Japon, le LA peut détecter les anticorps induits par une infection à L. caulleryi avec une sensibilité supérieure. Aucune agglutination n'a été détectée avec des sérums de poulets exempts d'organismes pathogènes spécifiés ou de poulettes qui n'ont pas été vaccinées avec l'antigène rR7 adjuvé huileux, ou infectées par L. caulleryi , ni avec des sérums de poulets inoculés avec d'autres agents pathogènes, mettant en évidence la spécificité de la méthode. Le test LA peut également être utilisé pour quantifier les anticorps sériques induits par la vaccination, ce qui n'est pas possible avec le test AGP. L'étude a montré que le test LA utilisant l'antigène rR7 est une méthode simple, rapide et utile pour la détection des anticorps contre L. caulleryi . Ein Schnelltest für den Nachweis von Antikörpern gegen Leukozytozoonose in Hühnern mittels eines Latexagglutinationstests unter Verwendung des rekombinanten R7-Antigens Es wurde eine Methode zum Nachweis von Antikörpern gegen Leukozytozoonose in Hühnern mitttels Latexagglutination (LA) entwickelt, wobei Latexkügelchen mit rekombinantem R7 (rR7), einem Antigen auf der äußeren Membran der Schizonten der zweiten Generation von Leucocytozoon caulleryi , beschichtet wurden. Verglichen mit dem in Japan häufig benutzten Agargelpräzipitationstest (AGP-Test) wies die LA eine größere Sensitivität zum Nachweis von durch L. caulleryi -induzierten Antikörpern auf. Weder mit Seren von spezifisch-pathogenfreien Hühnern und von Legehennen, die nicht mit der rR7-Antigen-Öl-Adjuvansvakzine geimpft oder mit L. caulleryi infiziert worden waren, noch mit Seren von Hühnern, die mit anderen Erregern inokuliert worden waren, wurde eine Agglutination gefunden, was die Spezifität dieses Tests nachweist. Der LA-Test kann außerdem zur Quantifizierung von durch Vakzination induzierten Serumantikörpern verwendet werden, was mit dem AGP-Test nicht möglich ist. Diese Studie hat gezeigt, dass die LA mit rR7-Antigen eine einfache, schnelle und nützliche Methode zum Nachweis von Antikörpern gegen L. caulleryi ist. Descripción de un ensayo rápido para detectar anticuerpos frente a Leucocytozoon en pollos mediante una prueba de aglutinación en látex utilizando un antígeno recombinante R7 Se desarrolló un método para detectar anticuerpos frente a Leucocytozoon en pollos, basado en la aglutinación en látex (LA), con gotas de látex tapizadas con recombinante R7 (rR7), una antígeno de la membrana externa de la segunda generación de esquizontes de Leucocytozoon caulleryi . En comparación con la técnica de ágar gel precipitación (AGP test), que se usa ampliamente en Japón, la LA pudo detectar anticuerpos inducidos por la infección con L. caulleryi con una mayor sensibilidad. No se detectó aglutinación con el suero proveniente de pollos libres de patógenos específicos o ponedoras que no habían sido vacunados con antígeno rR7 adyuvantado en aceite o infectados con L. caulleryi , ni con los sueros de pollos inoculados con otros patógenos, con lo cual se estableció la especificidad del ensayo. La técnica de LA también pudo ser utilizada para cuantificar los anticuerpos producidos tras la vacunación, lo cual no es posible con el método de AGP. Este estudio ha mostrado que la LA utilizando un antígeno rR7 es un método simple, rápido y útil para detectar anticuerpos frente a L.caulleryi .