Pressurized water versus ethanol as a Silybum marianum extraction solvent for inhibition of low-density lipoprotein oxidation mediated by copper and J774 macrophage cells

Silybum marianum contains flavonolignans, termed silymarin (SM), that are therapeutic agents for many inflammation-based diseases including atherosclerosis. Oxidation of human low-density lipoprotein was induced by CuSO₄ or J774 macrophage cells and measured by the formation of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). SM was extracted by pressurized hot water (PHWE) or ethanol, and the effects of these extracts on TBARS formation were evaluated in comparison with those of SM preparations made from blending masses of individual flavonolignan standards in ratios identical to those of the water and ethanol extracts. Ethanol-extracted SM and its blended counterpart inhibited the generation of TBARS by 82% and 43%, respectively, at 150μmol/L doses. TBARS levels in the presence of 150μmol/L of the PHWE and its blended SM counterpart were reduced by 84% and 38%, respectively. Extracts from milk thistle fruit displayed higher protective effects than blended SM solutions of the same concentration with an identical compositional makeup. The appearance of degradation peaks in the water extract did not create any cytotoxic effects. Results of this study confirm that PHWE can be used to extract flavonolignans from milk thistle and that these extracts may possess therapeutic potential different from or beyond that of traditional organic solvent preparations.

Le Silybum marianum contient des flavonolignanes, appelés silymarines (SM), qui sont des agents thérapeutiques utilisés pour traiter de nombreuses maladies inflammatoires, y compris l’athérosclérose. L’oxydation de la lipoprotéine de faible densité (oxLDL) humaine a été induite par CuSO₄ ou par des macrophages J774 (MΦ), et mesurée par la formation de substances réagissant avec l’acide thiobarbiturique (SRATB). Les effets sur la formation de SRATB d’extraits de SM obtenus au moyen d’eau chaude pressurisée (PHWE), d’extraits de SM obtenus à l’éthanol dans un appareil soxhlet et de préparations de SM faites à partir de mélanges de masses d’étalons individuels de flavonolignanes en proportions identiques à ceux des extraits par l’eau et par l’éthanol ont été évalués. La SM extraite par l’éthanol et sa contrepartie mélangée ont inhibé la production de SRATB de 82 % et de 43 %, respectivement, à une dose de 150 μmol/L. Les taux de SRATB en présence de 150 μM de SM PHWE et de sa contrepartie mélangée ont été réduits de 84 % et de 38 %. Les extraits du fruit du chardon Marie ont démontré des effets protecteurs plus efficaces que les solutions de SM mélangées de même concentration et d’une composition identique. L’apparition des pics de dégradation dans l’extrait aqueux n’a pas eu d’effet cytotoxique. Les résultats de cette étude confirment que la PHWE peut être utilisée pour extraire les flavonolignanes du chardon Marie, et que ces extraits pourraient avoir un potentiel thérapeutique différent de celui des préparations de solvants organiques traditionnels, ou lui être supérieur.