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Expression of prostaglandin G/H synthase (PGHS) and heat shock protein-70 (HSP-70) in the corpus luteum (CL) of prostaglandin F2a-treated immature superovulated rats

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In this study we examined the mechanism of corpus luteum (CL) regression by measuring changes in expression of prostaglandin G/H synthase-1 (PGHS-1) and -2 (PGHS-2) in day 4 CL and inducible heat shock protein 70 (HSP-70) in day 4 and day 9 CL of immature superovulated rats. The rats were superovulated and treated with 500 µg of prostaglandin F2a<> (PGF2a<>) on day 4 or day 9 after CL formation. Ovaries and serial blood samples were removed during the 24-hour period following treatment. Plasma progesterone was determined by radioimmunoassay while mRNA abundance and protein expression were assessed by semiquantitative RT-PCR and immunoblot analysis, respectively. One hour after PGF2a<>, both day 4 and day 9 rats exhibited a significant decrease in progesterone secretion; however, there was a greater decrease in day 9 rats. In ovarian samples removed on day 4, there was a significant increase in mRNA for PGHS-2 at 1 hour after PGF2a<>. PGHS-1 mRNA content remained unchanged. Immunoblot analyses showed an increase in PGHS-2 protein expression only at 8 h. There were no changes in PGHS-1 protein expression. In day 9 rats, ovarian HSP-70 protein levels increased by 50% after PGF2a<> injection; however, on day 4 there was no change in expression of this protein over the sampling period. These results suggest that expression of PGHS-2 may be involved in inhibiting progesterone production and that expression of HSP-70 may be required for complete CL regression in the rat.Key words: rat, prostaglandin F2a<>, corpus luteum, prostaglandin G/H synthase, heat shock protein-70.

Dans la présente étude, nous avons examiné le mécanisme de régression du corps jaune (CJ) en mesurant les variations d'expression de la prostaglandine G/H synthase-1 (PGHS-1) et 2 (PGHS-2), au jour 4, et de la protéine de stress 70 (HSP-70) inductible, aux jours 4 et 9 de la formation du CJ chez des rats immatures superovulés. Les rats ont été superovulés et traités avec 500 µg de prostaglandine F2a<> (PGF2a<>) les jours 4 et 9 suivant la formation du CJ. Les ovaires et des échantillons sanguins sériés ont été prélevés au cours des 24 heures qui ont suivi le traitement. Les taux de progestérone plasmatique ont été déterminés par radio-immunodosage alors que la quantité d'ARNm et l'expression de la protéine ont été évaluées par RT-PCR semi-quantitative et immunobuvardage, respectivement. Une heure après l'injection de la PGF2a<>, les rats des jours 4 et 9 ont montré une diminution significative de la sécrétion de progestérone, la diminution étant plus importante, toutefois, chez les rats du jour 9. Dans les échantillons d'ovaires prélevés le jour 4, une augmentation significative de la teneur en ARNm de la PGHS-2 a été observée 1 heure après l'injection de PGF2a<>. La teneur en ARNm de la PGHS-1 est demeurée inchangée. Les analyses d'immunobuvardage ont montré une augmentation de l'expression de la protéine PGHS-2 à 8 heures seulement. L'expression de la protéine PGHS-1 n'a pas été modifiée. Chez les rats du jour 9, les taux de la protéine HSP-70 dans les ovaires ont augmenté de 50 % après l'injection de PGF2a<>; toutefois, chez les rats du jour 4, l'expression de cette protéine n'a pas changé au cours de la période d'échantillonnage. Ces résultats donnent à penser que l'expression de la PGHS-2 pourrait jouer un rôle dans l'inhibition de la production de progestérone et que l'expression de la protéine HSP-70 pourrait être nécessaire pour la régression complète du CJ chez le rat.Mots clés : rat, prostaglandine F2a<>, corps jaune, prostaglandine G/H synthase, protéine de stress 70.[Traduit par la Rédaction]
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Document Type: Research Article

Publication date: May 1, 2004

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