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Angiotensin II and its receptors in human endocardial endothelial cells: role in modulating intracellular calcium

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he aims of the present study are to investigate the presence and distribution of angiotensin II (Ang II), as well as AT1 and AT2 receptors, in endocardial endothelial cells (EECs) and to determine if the effect of Ang II on intracellular calcium in these cells is mediated via the AT1 or the AT2 receptor. Immunofluorescence and 3D confocal microscopy techniques were used on 20-week-old fetal human EECs. Our results showed that Ang II and its receptors, the AT1 and the AT2 types, are present and exhibit a different distribution in human EECs. Ang II labelling is found throughout the cell with a fluorescence signal higher in the cytosol when compared with the nucleus. Like Ang II, the AT1 receptor fluorescence signal is also homogeneously distributed in human EECs but with a preferential labelling at the level of the nucleus, while the AT2 receptor labelling is solely present in the nucleus. Using fluo-3 and 3D confocal microscopy technique, superfusion of human EECs with increasing concentration of Ang II induced a dose-dependent sustained increase in free cytosolic and nuclear Ca2+ levels. This effect of Ang II on human EEC's intra cellular Ca2+ ([Ca2+]i) was completely prevented by losartan, an AT1 receptor antagonist. Our results suggest that Ang II, as well as AT1 and AT2 receptors, is present but differentially distributed in EECs of 20-week-old fetal human hearts, and that the AT1 receptor mediates the effects of Ang II on [Ca2+]i in these cells.Key words: angiotensin II, nuclear receptors, endocardial endothelial cells, Ang II receptors, intracellular calcium.

La présente étude a eu pour but d'examiner la présence et la répartition de l'angiotensine II (Ang II) et des récepteurs AT1 et AT2 dans les cellules endothéliales endocardiques (CEE) et de déterminer si l'effet de l'Ang II sur le calcium intracellulaire dans ces cellules est véhiculé par le récepteur AT1 ou le récepteur AT2. On a utilisé les techniques d'immunofluorescence et de microscopie confocale 3D pour visualiser les CEE de fœtus humains de 20 semaines. Nos résultats ont montré que l' Ang II et ses récepteurs, de types AT1 et AT2, sont présents et répartis différemment dans les CEE humaines. Le marquage de l'Ang II est observé dans toute la cellule avec un signal de fluorescence plus élevé dans le cytosol que dans le noyau. Comme pour l'Ang II, le signal de fluorescence du récepteur AT1 est réparti de manière homogène dans les CEE humaines, mais avec un marquage préférentiel au niveau du noyau, alors que le marquage du récepteur AT2 est observé uniquement dans le noyau. En utilisant le fluo-3 et la technique de microscopie confocale 3D, la superfusion des CEE humaines avec une concentration croissante d'Ang II a induit une augmentation soutenue dose-dépendante des taux de Ca2+ nucléaires et cytosoliques libres. Cet effet de l'Ang II sur le Ca2+ intracellulaire ([Ca2+]i) des CEE humaines a été prévenu par le losartan, un antagoniste des récepteurs AT1 de l'Ang II. Nos résultats donnent à penser que l'Ang II et les récepteurs AT1 et AT2 sont présents mais répartis différemment dans les CEE des cœurs des fœtus humains de 20 semaines, et que le récepteur AT1 véhicule les effets de l'Ang II sur la [Ca2+]i dans ces cellules.Mots clés : angiotensine II, récepteurs nucléaires, cellules endothéliales endocardiques, récepteurs de l'Ang II, calcium intracellulaire.[Traduit par la Rédaction]
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Document Type: Research Article

Publication date: March 1, 2003

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