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Evaluation of an enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) for the serological diagnosis of canine sarcoptic mange

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Abstract  The purpose of this study was to evaluate a serodiagnostic test (enzyme‐linked immunosorbent assay; ELISA) for sarcoptic mange in dogs and to characterize the assay antigen, based on the mite Sarcoptes scabiei var. vulpes. The ELISA, applied to sera from 359 dogs suspected of having sarcoptic mange, showed a sensitivity and specificity of 92 and 96%, respectively. Sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS‐PAGE) of the antigen employed in the ELISA revealed polypeptide bands with molecular weights ranging between 14 and 164 kDa. In Western blot analyses antigens of molecular weights between 62 and 64 kDa dominated. Particularly dominant were antigens of 164 and 147 kDa. These were found to have isoelectrical points in the range of 5.7–6.9.

Sera from dogs infected with Cheyletiella sp., Demodex canis, Linognathus setosus and Otodectes cynotis, as well as from dogs allergic to fleas, were negative in the ELISA.

Résumé— Le but de cette étude est d'évaluer un test sérologique ELISA pour le diagnostic de la gale sarcoptique chez le chien et de caractériser l'antigène révélateur, extrait de l'acarien Sarcoptes scabiei var. vulpes. Le test ELISA, lors d'une étude conduite avec les sérums de 359 chiens suspects de gale sarcoptique a démontré une sensibilité et une spécificité de 92 et 96%, respectivement. L'électrophorèse en gel polyacrilamide dodécyl sulfate de sodium de l'antigène utilisé dans l'ELISA a révélé des bandes polypeptidiques de poids moléculaire compris entre 14 et 164 kDa. Dans l'analyse en Western blot, les antigènes de poids moléculaire compris entre 62 et 164 kDa étaient les plus abondants, notamment ceux de 164 et 147 kDa. Ces derniers ont des points isoélectriques compris entre 5.7 et 6.9.

Les sérums de chiens infectés par des Cheyletiella sp. Demodex canis, Linognathus setosus et Otodectes cynotis, ou par des chiens allergiques aux puces, se sont révélés négatifs en ELISA. [Bornstein, S., Thebo, P., Zakrisson, G. Evaluation of an enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) for the serological diagnosis of canine sarcoptic mange (Evaluation d'un test ELISA pour le diagnostic sérologique de la gale sarcoptique canine). Veterinary Dermatology 1996; 7: 21–28.]

Resumen  El objetivo de este estudio fue el de evaluar una pruba serodiagnóstica (prueba de inmunoadsorción ligada a enzima; ELISA) para la sarna sarcóptica en el perro y caracterizar el antigeno prueba, basado en el ácaro Sarcoptes scabei, var. vulpes. El ELISA, aplicado a sueros de 359 perros sospechosos de padecer sarna sarcóptica, mostró una sensibilidad y especificidad del 92 y 96%, respectivamente. La electroforesis en gel de poliacrilamida dodecil sulfato sódico (SDS‐PAGE) del antigeno usado en el ELISA reveló bandas de polipétidos con peso molecular entre 14 y 164 kDa. En el análisis Western blot, predominaron los antigenos de pesos moleculares entre 62 y 164 kDa. Los antigenos entre 164 y 147 kDa fueron especialmente predominantes. Estos tuvieron puntos isoeléctricos entre 5.7 y 6.9. Los sueros de perros infectados por Cheyletiella sp., Demodex canis, Linognathus setosus y Otodectes cynotis, asi como el de perros alérgicos a las pulgas fueron negativos en el ELISA. [Bornstein, S., Thebo, P., Zakrisson, G. Evaluation of an enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) for the serological diagnosis of canine sarcoptic mange (Evaluation de una prueba de immunoadsorcion ligada a enzima (ELISA) para el diagnostico serologico de la sarna sarcóptica canina). Veterinary Dermatology 1996; 7: 21–28.]

Zusammenfassung— Ziel dieser Studie war, einen Serodiagnostiktest (Enzyme‐Linked‐Immunosorbent‐Assay, ELISA) für Sarkoptesräude des Hundes zu überprüfen und das Testantigen zu charakterisieren, das auf der Milbe Sarcoptes scabiei var. vulpes basiert. Der ELISA‐Test, der bei den Sera von 359 Hunden mit Sarkoptesverdacht angewendet wurde, zeigte eine Sensitivität von 92% bzw. 96%. Die Natriumdodecylsul‐fatpolyacrylamid‐Gelelektrophorese (SDS‐PAGE) des Antigen, das im ELISA verwendet wurde, zeigte Polypeptid‐Banden mit Molekulargewichten zwischen 14 und 164 kDa. In der Wester‐blot‐Analyse dominierten Antigene mit einem Molekulargewicht zwischen 62 und 164 kDa. Besonders dominierend waren Antigene von 164 und 147 kDa. Bei diesen stellte man isoelektrische Punkte im Bereich von 5,7 bis 6,9 fest.

Die Sera von Hunden, die mit Cheyletiella sp., Demodex canis, Linognathus setosus und Otodectes cynotis infiziert waren, fielen ebenso wie die Hunde mit Allergie auf Flöhe im ELISA negativ aus. [Bornstein, S., Thebo, P., Zakrisson, G. Evaluation of an enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) for the serological diagnosis of canine sarcoptic mange (Die Auswertung eines Enzym‐Linked‐Immunosorbent‐Assay (ELISA) für die serologische Diagnose der kaninen Sarkoptesräude). Veterinary Dermatology 1996; 7: 21–28.]
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Document Type: Original Article

Affiliations: Department of Parasitology, National Veterinary Institute and, Swedish University of Agricultural Sciences, PO Box 7073, S-750 07 Uppsala, Sweden

Publication date: March 1, 1996

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