Authors: Babu, Sajesh; Ramachandra, Nallur B.

Source: Genome, Volume 50, Number 4, April 2007 , pp. 343-350(8)

Publisher: NRC Research Press

Abstract:

An extensive ethylmethanesulfonate mutagenesis of Drosophila melanogaster was undertaken to isolate the stronger alleles of 3 indirect flight-muscle mutations. We isolated 17 strong mutant lines, with nearly complete penetrance and expressivity, using direct screening under polarized light, from more than 1700 mutagenized chromosomes. On complementation, we found 11 of these 17 mutant lines to be alleles of 3 indirect flight-muscle mutations (Ifm(2)RU1, 3 noncomplementing lines; ifm(2)RU2, 6 alleles; ifm(2)RU3, 2 alleles) of the previously isolated 8 complementation groups (Ifm(2)RU1to ifm(2)RU8). In addition, we found 6 new complementation groups with strong defects in adult-muscle morphology; we named these ifm(2)RS1to ifm(2)RS6. All mutant lines were mapped by meiotic recombination, and 5 of the 6 new complementation lines were mapped using chromosome deficiencies. ifm(2)RS1 maps to a region that harbors ifm(2)RU4 (a mutation that was isolated previously); however, theses are not alleles because each complements the other mutation, and the mutant-muscle phenotype is very different. We used direct screening under polarized light to find recessive mutations; although this method was labor intensive, it can be used to identify recessive genes involved in myogenesis, unlike screens for flightlessness or wing-position defects. This screen identifies regions on the second chromosome that harbor probable genes that are likely expressed in the mesoderm and are thought to be involved in myogenesis. This screen has generated valuable resources that will help us to understand the role of many molecular players involved in myogenesis.

Une mutagenèse exhaustive à l'éthyle méthane sulfonate a été réalisée chez le Drosophila melanogaster afin d'isoler des allèles plus forts pour trois mutations affectant les muscles indirects de vol. Les auteurs ont isolé 17 lignées mutantes à allèles forts présentant une pénétrance et une expressivité presque complètes en criblant directement sous lumière polarisée parmi 1700 chromosomes traités. Suite à la complémentation, 11 des 17 mutants se sont avérés alléliques à une de trois mutations affectant les muscles indirects de vol (Ifm(2)RU1 - 3 mutants non-complémentants, ifm(2)RU2 - 6 allèles, ifm(2)RU3 - 2 allèles) parmi les huit groupes de complémentation déjà connus et désignés Ifm(2)RU1 à ifm(2)RU8. De plus, les auteurs ont trouvé six nouveaux groupes de complémentation présentant un phénotype marqué au niveau de la morphologie musculaire chez l'adulte. Ces locus ont été nommés ifm(2)RS1 - ifm(2)RS6. Toutes les mutations ont été cartographiées sur la base de la recombinaison méiotique et cinq des six nouvelles mutations ont été situées au moyen de délétions chromosomiques. Ifm(2)RS1 se trouve dans une région qui contient ifm(2)RU4 (une mutation identifiée antérieurement), mais ces mutations ne sont pas alléliques puisqu'elles se complémentent et que leurs phénotypes musculaires sont très différents. Les auteurs ont exploité les avantages d'un crible direct sous lumière polarisée pour isoler des mutations récessives. Bien qu'il soit laborieux, le crible pour identifier des gènes récessifs impliqués dans la myogenèse est possible contrairement à d'autres cribles fondés sur l'inaptitude à voler ou les défectuosités en matière de positionnement des ailes. Le crible identifie des régions sur le chromosome 2 qui portent plusieurs gènes probables dont les profils prédits d'expression sont dans le mésoderme et seraient impliqués dans la myogenèse. Ce crible a fourni des ressources génétiques utiles qui aideront à mieux comprendre les rôles de plusieurs acteurs moléculaires impliqués dans la myogenèse.

Document Type: Research article

Publication date: 2007-04-01

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