Microsatellite markers reveal multiple paternity and sperm storage in the Mediterranean spur-thighed tortoise, Testudo graeca

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Abstract:

The spur-thighed tortoise (Testudo graeca) is a terrestrial species in which multiple mating is frequently observed. We assessed the probability of multiple paternity in clutches (n = 15) laid by eight females, including successive clutches. Paternity was determined by microsatellite analyses at three loci. A large number of alleles per locus (n = 15–22) provided high probabilities of detecting multiple paternity, particularly at all loci combined (P = 0.989). Multiple paternity was found in 20% of the clutches in which offspring displayed more than two paternal alleles. However, this frequency may have been underestimated, given the small clutch sizes and the few loci used. Also, T. graeca is able to store sperm from single or multiple matings and can use it to fertilize subsequent clutches of eggs, as indicated by the fact that the second clutch of a captive female was sired by a different male and that clutches of another female were multiply sired by the same males. These results confirm that multiple paternity exists in T. graeca and that sperm storage in this species may be an important reproductive strategy to fertilize multiple clutches per year.

La tortue grecque (Testudo graeca) est une espèce terrestre chez laquelle il y a souvent des accouplements multiples. Nous avons évalué la probabilité de paternités multiples dans 15 couvées déposées par huit femelles, y compris des pontes successives. La paternité a été déterminée par l'analyse de trois locus microsatellites. Un nombre élevé d'allèles par locus (n = 15–22) permettait la détection de paternités multiples avec une probabilité élevée (P = 0,989), particulièrement par l'analyse combinée de l'ensemble des locus. Nous avons observé une paternité multiple dans 20 % des couvées pour lesquelles la progéniture possède plus de deux allèles d'origine paternelle. Par ailleurs, cette fréquence est probablement sous-estimée, étant donné le faible nombre de petits par couvée et le nombre peu élevé de locus étudiés. Également, la seconde ponte d'une femelle en captivité a été fécondée par un mâle différent de la première et les couvées successives d'une autre femelle ont été fécondées conjointement par les mêmes mâles; ces observations confirment que T. graeca est capable de stocker le sperme d'un ou plusieurs accouplements et de l'utiliser par la suite pour féconder ses pontes successives. Nos résultats démontrent l'existence de la paternité multiple chez cette espèce et de la mise en réserve du sperme comme stratégie reproductive importante pour pouvoir féconder plusieurs pontes au cours de l'année.

Document Type: Research Article

Publication date: January 1, 2004

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