IngentaConnect Influence of IL-6 on MDR and MRP-mediated multidrug resistance in...

Abstract:

The objective of this study was to examine effects of interleukin-6 (IL-6) on the expression and activity of the drug resistance transporters (MDR1 and MRP) in human hepatoma cell lines. Expression and activity of MDR1 and MRP transporters were examined in IL-6-treated and control HuH 7 and HepG2 cells using semi-quantitative RT-PCR analysis and by rhodamine 123 and 5-carboxyfluorescin efflux assays. Results from RT-PCR demonstrated expression of MRP3, MRP6, and MDR1 in HuH 7 cells and expression of MRP1, MRP2, MRP3, MRP6, and MDR1 in HepG2 cells. Compared with controls, treatment of HuH 7 cells with IL-6 (10 ng/mL, 24 h) resulted in a 1.8-fold increase in MRP-mediated efflux of 5-CF with a corresponding 1.5-fold induction of MRP3 mRNA levels (p < 0.05). Similarly, in HepG2 cells, a 2-fold increase in MRP functional activity and a 1.8-fold induction of MRP1 mRNA levels were seen in the IL-6 treated cells (p < 0.05). Treatment of cells with IL-6 was also found to cause significant reductions in the expression and activity of MDR1 in HuH 7 cells, but not in HepG2 cells. Our data suggest that IL-6 induces MRP expression and activity in human hepatoma cell lines. Suppressive effects of IL-6 on MDR1 expression and activity were also observed in HuH 7 cells. This underscores the importance of examining the regulation of multiple drug resistance proteins as these proteins may have opposing regulatory mechanisms in malignant cells.Key words: P-Glycoprotein, multidrug resistance proteins, hepatocarcinogenesis, cytokines, inflammation.

Objectif : Examiner les effets de l'interleukine-6 (IL-6) sur l'expression et l'activité des transporteurs de résistance aux médicaments (MDR1 et MRP) dans des lignées cellulaires d'hépatome humain. Méthodes : L'expression et l'activité des transporteurs MDR1 et MRP ont été examinées dans des cellules HuH 7 et HepG2 traitées à l'IL-6 et témoins, en utilisant la technique de RT-PCR semi-quantitative ainsi que des tests d'efflux à la rhodamine 123 et à la 5-carboxyfluorescine. Résultats : La RT-PCR a démontré l'expression des protéines MRP3, MRP6 et MDR1 dans les cellules HuH 7, et des protéines MRP1, MRP2, MRP3, MRP6 et MDR1 dans les cellules HepG2. Par comparaison aux cellules témoins, dans les cellules HuH 7, le traitement à l'IL-6 (10 ng/mL, 24 h), a provoqué une augmentation d'un facteur 1,8 de l'efflux de 5-CF véhiculé par les MRP et une induction d'un facteur 1,5 des taux d'ARNm de MRP3 (p < 0,05). De même, dans les cellules HepG2, le traitement à l'IL-6 a causé une augmentation d'un facteur 2 de l'activité fonctionnelle des MRP et une induction d'un facteur 1,8 des taux d'ARNm de MRP1. De plus, le traitement des cellules à l'IL-6 a provoqué des réductions significatives de l'expression et de l'activité de MDR1 dans les cellules HuH 7, mais pas dans les cellules HepG2. Conclusions : Nos résultats donnent à penser que l'IL-6 induit l'expression et l'activité des MRP dans les lignées cellulaires d'hépatome humain. Des effets suppresseurs de l'IL-6 sur l'expression et l'activité de MDR1 ont aussi été observés dans les cellules HuH 7. Ces observations soulignent l'importance d'examiner la régulation des protéines de multirésistance aux médicaments étant donné que ces protéines pourraient avoir des mécanismes régulateurs opposés dans les cellules malignes. Mots clés : glycoprotéine P, protéines de multirésistance aux médicaments, hépatocarcinogenèse, cytokines, inflammation.[Traduit par la Rédaction]

Influence of IL-6 on MDR and MRP-mediated multidrug resistance in human hepatoma cells