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Comparative evaluation of a chromogenic agar medium - PCR protocol with a conventional method for isolation of Vibrio parahaemolyticus strains from environmental and clinical samples

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Abstract:

Screening for pathogenic Vibrio parahaemolyticus has become routine in certain areas associated with food-borne outbreaks. This study is an evaluation of the CHROMagar Vibrio (CV) medium - PCR protocol and the conventional method (TCBS (thiosulfate - citrate - bile salts - sucrose) agar plus biochemical and Wagatsuma agar tests) for detection of V. parahaemolyticus in shrimp, water, sediment, and stool samples collected for biosurveillance in an endemic area of northwestern Mexico. A total of 131 environmental and clinical samples were evaluated. The CV medium - PCR protocol showed a significantly improved ability (P < 0.05) to isolate and detect V. parahaemolyticus, identifying isolates of this bacteria missed by the conventional method. Although some other bacteria, distinct from pathogenic V. parahaemolyticus, produced violet colonies similar to that of V. parahaemolyticus on CV medium, we were able to detect a superior number of samples of V. parahaemolyticus with the CV medium - PCR protocol than with the conventional method. The Kanagawa phenomenon is routinely determined on Wagatsuma agar for the diagnosis of V. parahaemolyticus (pathogenic) positive for thermostable direct hemolysin (TDH) in developing countries. In our results, Wagatsuma agar showed low sensitivity (65.4% at 24 h and 75.6% at 48 h) and specificity (52.4% at 48 h) for identifying V. parahaemolyticus positive for TDH. Overall, our data support the use of the CV medium - PCR protocol in place of the conventional method (TCBS - biochemical tests - Wagatsuma agar) for detection of pathogenic V. parahaemolyticus, both in terms of effectiveness and cost efficiency.

Le dépistage de Vibrio parahaemolyticus pathogène est réalisé de routine dans certaines régions associées à l’éclosion de maladies alimentaires. Cette étude consiste à évaluer le protocole de gélose CHROMagar Vibrio (CV) - PCR et la méthode conventionnelle (gélose TCBS (« thiosulfate - citrate - bile salts - sucrose ») plus tests biochimiques et gélose Wagatsuma) pour détecter V. parahaemolyticus dans des échantillons de crevettes, d’eau, de sédiments et de selles, récoltés pour la surveillance biologique d’une zone d’endémicité du Nord-Ouest du Mexique. Un total de 131 échantillons environnementaux et cliniques a été évalué. Le protocole de gélose CV-PCR a montré une capacité significativement améliorée (P < 0,05) d’isoler et de détecter V. parahaemolyticus, en identifiant des isolats de cette bactérie non repérés par la méthode conventionnelle. Même si quelques bactéries, distinctes de V. parahaemolyticus pathogène, produisent des colonies violettes similaires à V. parahaemolyticus sur gélose CV, nous avons pu détecter un plus grand nombre d’échantillons contenant V. parahaemolyticus avec le protocole de gélose CV-PCR qu’avec la méthode conventionnelle. Le phénomène de Kanagawa est habituellement déterminé sur une gélose Wagatsuma afin de diagnostiquer le V. parahaemolyticus positif au TDH (« thermostable direct hemolysin » pathogène) dans les pays en voie de développement. Dans nos conditions, la gélose Wagatsuma était moins sensible (65,4 % a 24 h et 75,6 % à 48 h) et moins spécifique (52,4 % à 48 h) dans l’identification de V. parahaemolyticus positif au TDH. Globalement, nos données appuient l’utilisation du protocole de gélose CV-PCR plutôt que les méthodes conventionnelles (gélose TCBS - tests biochimiques - gélose Wagatsuma) pour détecter V. parahaemolyticus pathogène, tant en terme d’efficacité que de coût/rendement.

Document Type: Research Article

Publication date: 2011-02-01

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  • Published since 1954, this monthly journal contains new research in the field of microbiology including applied microbiology and biotechnology; microbial structure and function; fungi and other eucaryotic protists; infection and immunity; microbial ecology; physiology, metabolism and enzymology; and virology, genetics, and molecular biology. It also publishes review articles and notes on an occasional basis, contributed by recognized scientists worldwide.
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