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Biofilm evidence and the microbial diversity of horse wounds

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Abstract:

Evidence of biofilms in human chronic wounds are thought to be responsible for preventing healing in a timely manner. However, biofilm evidence in horse wounds has not yet been documented. Consequently, this study aimed to determine whether biofilms could be detected in wounds, and to investigate the microbiology of chronic wounds in horses. Prior to analysis, wound surfaces were irrigated with 5 mL of sterile saline to remove debris. All wounds were swabbed twice (1 cm2 area) using sterile cotton-tipped swabs. In addition to this, 2 tissue biopsies were taken to investigate evidence of biofilm and the microbiology richness of the wounds. All swabs and 1 biopsy sample were transported to the laboratory in Robertson’s cooked meat broth. Traditional culturable techniques and denaturing gradient gel electrophoresis with PCR were utilized to identify common bacteria isolated in all wounds. Following analysis of a number of the biopsy samples, biofilms could be clearly seen. The most common bacteria isolated from each wound analysed included Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus epidermidis, Serratia marcescens, Enterococcus faecalis, and Providencia rettgeri. Sequencing of the 16S ribosmonal DNAs, selected on the basis of DGGE profiling, enabled identification of bacterial species not identified using culturable technology. This study is the first to identify biofilms in the chronic wounds of horses. In addition, this study also demonstrated the importance of combining DGGE-PCR with culture techniques to provide better microbiology analysis of chronic wounds.

La présence de biofilms dans les plaies chroniques chez l’humain semble empêcher la guérison dans les meilleurs délais. Cependant, la présence de biofilms dans les plaies chez le cheval n’a pas été très bien documentée jusqu’à présent. En conséquence, cette étude a pour but de déterminer si des biofilms pouvaient être détectés dans les plaies et d’étudier la microbiologie des plaies chroniques chez le cheval. Avant l’analyse, la surface des plaies a été irriguée avec 5 mL de saline stérile pour enlever les débris. Toutes les plaies ont été tamponnées deux fois (surface de 1 cm2) avec un coton-tige stérile. De plus, deux biopsies des tissus ont été prélevées pour rechercher la présence de biofilms et évaluer la diversité microbiologique des plaies. Tous les cotons-tiges et un échantillon de biopsie ont été transportés au laboratoire dans le milieu RCM (« Robertson’s cooked meat »). Des techniques de culture traditionnelles et des électrophorèses sur gel en gradient dénaturant combinées à des réactions en PCR ont été utilisées pour identifier les bactéries communes à toutes les plaies. À la suite des analyses d’un certain nombre de plaies, des biofilms ont été clairement détectés. Les bactéries les plus fréquemment isolées de chacune des plaies analysées comprenaient Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus epidermis, Serratia marcescens, Enterococcus faecalis et Providencia rettgeri. Le séquençage des ADN ribosomaux 16S, sélectionnés sur la base des profils en DGGE, a permis d’identifier des espèces bactériennes que les techniques de cultures ne permettaient pas d’identifier. Cette étude est la première à identifier les biofilms présents dans les plaies chroniques chez le cheval. En plus, cette étude a aussi démontré l’importance de combiner la DGGE-PCR et les techniques de culture pour obtenir de meilleures analyses microbiologiques des plaies chroniques.

Document Type: Research Article

Publication date: February 1, 2009

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  • Published since 1954, this monthly journal contains new research in the field of microbiology including applied microbiology and biotechnology; microbial structure and function; fungi and other eucaryotic protists; infection and immunity; microbial ecology; physiology, metabolism and enzymology; and virology, genetics, and molecular biology. It also publishes review articles and notes on an occasional basis, contributed by recognized scientists worldwide.
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nrc/cjm/2009/00000055/00000002/art00012
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