Isolation and characterization of plaque-purified strains of Malacosoma disstria Nucleopolyhedrovirus

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Seven plaque-purified genotypic variants or strains, derived from a previously described field isolate of the Malacosoma disstria Nucleopolyhedrovirus (MadiNPV) from Alberta populations of forest tent caterpillar, were characterized based on distinctive restriction endonuclease fragment patterns. Two strains, MadiNPV-pp3 and MadiNPV-pp11, were selected for further characterization, as they represented strains producing high and low budded virus (BV) titres, respectively, in the M. disstria cell line UA-Md203. Analysis of restriction endonuclease fragment profiles indicated the genomes differed significantly in size, 133.8 ± 2.4 kb for MadiNPV-pp3 and 118.1 ± 3.5 kb for MadiNPV-pp11. These strains were characterized based on their BV production in three different cell lines derived from M. disstria haemocytes. Compared with MadiNPV-pp11, MadiNPV-pp3 produced two- to three-fold more BVs in UA-Md203 and 210 other cell lines; however, BV production was only marginally higher for MadiNPV-pp3 in the UA-Md221 cell line. Similarly, the yield of polyhedral inclusion bodies was significantly higher for MadiNPV-pp3 in UA-Md203 and 210 cell lines than for MadiNPV-pp11 but not in the UA-Md221 cell line. This data, although derived from a limited number of cell lines, suggested MadiNPV-pp3 may have a broader tissue tropism than MadiNPV-pp11.Key words: forest tent caterpillar, Malacosoma disstria, Nucleopolyhedrovirus.

Nous avons caractérisé sept variantes génotypiques ou souches purifiées à partir de plages, dérivées d'un isolat de champs préalablement décrit du nucléopolyédrovirus Malacosoma disstria (MadiNPV) issu de populations de livrées des forêts de l'Alberta, en se basant sur des patrons distinctifs de fragments d'endonucléases de restriction. Deux souches, MadiNPV-pp3 et MadiNPV-pp11, ont été sélectionnées pour une caractérisation ultérieure puisqu'elles représentaient des souches produisant respectivement des titres élevés et bas de VB chez la lignée cellulaire UA-Md203 de M. disstria. L'analyse des profils de fragments d'endonucléases de restriction a indiqué que les génomes différaient significativement en taille, 133,8 ± 2,4 kb pour MadiNPV-pp3 et 118,1 ± 3,5 kb pour MadiNPV-pp11. Ces souches furent caractérisées selon leur production de virus bourgeonnants (VB) chez trois lignées cellulaires différentes dérivées d'hémocytes de M. disstria. MadiNPV-pp3 a produit de 2-3 fois plus de VB chez les lignées cellulaires UA-Md203 et 210 que MadiNPV-pp11; toutefois, la production de VB était seulement marginalement plus élevée pour MadiNPV-pp3 chez la lignée cellulaire UA-Md221. De même, le rendement de corps d'inclusions polyhédriques était significativement supérieur pour MadiNPV-pp3 chez les lignées cellulaires UA-Md203 et 210 que pour MadiNPV-pp11 mais non chez la lignée cellulaire UA-Md221. Bien que dérivées d'un nombre limité de lignées cellulaires, ces données indiquent que MadiNPV-pp3 pourrait avoir un tropisme tissulaire plus large que MadiNPV-pp11.Mots clés : livrée des forêts, Malacosoma disstria, nucléopolyédrovirus.[Traduit par la Rédaction]

Document Type: Research Article

Publication date: March 1, 2006

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