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A simple procedure for elimination of fungal contamination for enumeration of iron-oxidizing bacteria from bioleaching matrix of sewage sludge

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Enumeration of iron-oxidizing bacteria from the bioleaching matrix of sewage sludge is always confronted by fungal contamination. The objective of the present study was to find a reliable and simple method to remove fungal growth and to shorten the incubation time for facilitating enumeration of the iron-oxidizers from complex sludge samples. The results demonstrated that filtering the sludge sample through sterile No. 5 Whatman filter paper before serial dilution was effective in eliminating the fungal growth on agarose media. Both the counts and the incubation time required for enumeration were highly dependent on the medium pH, with maximum counts at pH 2.5–2.75. Medium prepared at pH values outside of this range led to lower counts and a longer lag time for colony formation. However, the introduction of heterotrophic microorganisms into the solid medium did not show further improvement in enumeration efficiency and shortening of the incubation period. By incorporating the optimal conditions obtained, the incubation time could be reduced to 7 and 10 d for pure cultures and sludge samples, respectively.Key words: Acidithiobacillus ferrooxidans, iron-based bioleaching process, growth media, sewage sludge.

Le décompte des bactéries ferro-oxydantes de la matrice de biolixiviation de boues d'égouts est toujours confronté à une contamination par des champignons. L'objectif de cette étude était de trouver une méthode simple et fiable pour éliminer la croissance fongique et raccourcir le temps d'incubation afin de faciliter le décompte de ferro-oxydants à partir d'échantillons de boues complexes. Les résultats ont démontré que la filtration des échantillons de boues à travers un papier filtre Whatman No. 5 préalablement à la dilution en série était efficace pour éliminer la croissance fongique sur un milieu d'agarose. Les comptes et le temps d'incubation requis pour le dénombrement était fortement dépendants du pH du milieu avec des comptes maximaux à un pH de 2,5–2,75. Des milieux préparés à des pH supérieurs ont mené à des comptes inférieurs et à un plus long temps de latence pour la formation de colonies. Toutefois, l'ajout de micro-organismes hétérotrophes dans le milieu solide n'a pas entraîné d'amélioration substantielle de l'efficacité du dénombrement et du raccourcissement de la période d'incubation. En appliquant les conditions optimales, le temps d'incubation a pu être réduit à 7 et 10 jours respectivement pour des cultures pures et des échantillons de boues.Mots clés : Acidithiobacillus ferrooxidans, procédés de biolixiviation basée sur le fer, milieu de culture, boues d'égouts.[Traduit par la Rédaction]

Document Type: Research Article

Publication date: 2005-08-01

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  • Published since 1954, this monthly journal contains new research in the field of microbiology including applied microbiology and biotechnology; microbial structure and function; fungi and other eucaryotic protists; infection and immunity; microbial ecology; physiology, metabolism and enzymology; and virology, genetics, and molecular biology. It also publishes review articles and notes on an occasional basis, contributed by recognized scientists worldwide.
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