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OmpD but not OmpC is involved in adherence of Salmonella enterica serovar Typhimurium to human cells

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Abstract:

Conflicting reports exist regarding the role of porins OmpC and OmpD in infections due to Salmonella enterica serovar Typhimurium. This study investigated the role of these porins in bacterial adherence to human macrophages and intestinal epithelial cells. ompC and ompD mutant strains were created by transposon mutagenesis using P22-mediated transduction of Tn10 and Tn5 insertions, respectively, into wild-type strain 14028. Fluorescein-labeled wild-type and mutant bacteria were incubated with host cells at various bacteria to cell ratios for 1 h at 37 °C and analyzed by flow cytometry. The mean fluorescence intensity of cells with associated wild-type and mutant bacteria was used to estimate the number of bacteria bound per host cell. Adherence was also measured by fluorescence microscopy. Neither assay showed a significant difference in binding of the ompC mutant and wild-type strains to the human cells. In contrast, the ompD mutant exhibited lowered binding to both cell types. Our findings suggest that OmpD but not OmpC is involved in the recognition of Salmonella serovar Typhimurium by human macrophages and intestinal epithelial cells.Key words: Salmonella, adherence, porins, intestinal epithelial cells, macrophage.

Il existe des rapports conflictuels à propos du rôle des porines OmpC et OmpD dans les infections causées par Salmonella enterica sérovar Typhimurium. Cette étude a examiné le rôle de ces porines sur l'adhérence des bactéries à des macrophages humains et à des cellules épithéliales intestinales. Des souches mutantes de ompC et ompD ont été créées par mutagénèse par transposon à l'aide de la transduction d'insertions facilitée par P22 de Tn10 et Tn5, respectivement, chez la souche de type sauvage 14028. Des bactéries de type sauvage et mutantes marquées avec de la fluorescéine ont été incubées avec des cellules de l'hôte à divers rapports bactéries:cellules pendant 1 h à 37 °C, puis analysées par cytométrie en flux. L'intensité moyenne de la fluorescence des cellules associées avec les bactéries de type sauvage et mutantes à été utilisée afin d'estimer le nombre de bactéries liées à chaque cellule de l'hôte. L'adhérence a également été mesurée par microscopie à fluorescence. Aucune des deux analyses n'a démontré de différence significative dans la liaison aux cellules humaines du mutant ompC et de la souche sauvage. En revanche, le mutant ompD s'est moins bien lié aux deux types cellulaires. Nos constatations indiquent que OmpD, mais non OmpC, est impliqué dans la reconnaissance de S. typhimurium par les macrophages humains et les cellules épithéliales intestinales.Mots clés : salmonelles, adhérence, porines, cellules épithéliales intestinales, macrophages.[Traduit par la Rédaction]

Document Type: Research Article

Publication date: 2004-09-01

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  • Published since 1954, this monthly journal contains new research in the field of microbiology including applied microbiology and biotechnology; microbial structure and function; fungi and other eucaryotic protists; infection and immunity; microbial ecology; physiology, metabolism and enzymology; and virology, genetics, and molecular biology. It also publishes review articles and notes on an occasional basis, contributed by recognized scientists worldwide.
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