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Involvement of the hap gene (mucinase) in the survival of Vibrio cholerae O1 in association with the blue-green alga, Anabaena sp.

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Abstract:

Mucinase is a soluble haemagglutinin protease, which may be important for the survival of Vibrio cholerae in association with mucilaginous blue-green algae (cyanobacteria). A comparative survival study was carried out with an Anabaena sp. and a wild-type V. cholerae O1 strain hap+ gene (haemagglutinin-protease), together with its isogenic mutant hap (hap-deleted gene). A simple spread plate technique was followed to count culturable V. cholerae O1 on taurocholate tellurite gelatin agar plate. The fluorescent antibody technique of Kogure et al. (1979) was used for the microscopical viable count of V. cholerae O1. Polymerase chain reaction (PCR) and Southern blot hybridization were carried out to detect a lower number of viable but nonculturable (VBNC) V. cholerae O1 from the laboratory-based experiments. The wild and mutant V. cholerae O1 strains survived in culturable form for 22 and 10 days, respectively, in association with the Anabaena sp., with the difference being statistically significant (P < 0.01). The fluorescent antibody technique, PCR, and hybridization results also showed that the wild strain survived better in the VBNC state than did the mutant VBNC strain in association with an Anabaena sp. These results indicate that the enzyme mucinase may play an important role in the association and long-term survival of V. cholerae O1 with a mucilaginous blue-green alga, Anabaena sp.Key words: Vibrio cholerae, Anabaena, mucinase, reservoir.

La mucinase est une protéase hémagglutinine soluble qui pourrait être importante pour la survie de Vibrio cholerae en association l'algue bleue mucilagineuse. Nous avons effectué une étude comparative de la survie avec une Anabaena sp. et une souche sauvage de V. cholerae (souche O1) de génotype hap+ (hémagglutinine-protéase) de même qu'avec son mutant isogénique hap (gène hap délété). Une technique d'étalement simple fut suivie d'un décompte des V. cholerae O1 cultivables sur des géloses d'agar taurocholate tellurite gélatine. Nous avons utilisé la technique d'anticorps fluorescents (AF) de Kogure et al. (1979) afin de déterminer les comptes microscopiques viables de V. cholerae O1. Nous avons également effectué des réactions de polymérase en chaîne (PCR) et des hybridations de type Southern dans le but de détecter des nombres plus faibles de V. cholerae O1 viables mais non cultivables (VMNC) à partir des expériences de laboratoire. Les souches sauvages et mutantes de V. cholerae O1 ont survécu sous forme cultivable pendant respectivement 22 et 10 jours, en association avec Anabaena sp.; la différence était statistiquement significative (P < 0,01). Les résultats d'AF, de PCR et d'hybridation ont également démontré que la souche sauvage survivait mieux dans l'état VMNC que le mutant VMNC en association avec Anabaena sp. Ces résultats indiquent que la mucinase serait appelée à jouer un rôle important dans l'association et la survie à long terme de V. cholerae O1 avec l'algue bleue mucilagineuse, Anabaena sp.Mots clés : Vibrio cholerae, Anabaena, mucinase, réservoir.[Traduit par la Rédaction]

Keywords: Anabaena; Vibrio cholerae; mucinase; reservoir; réservoir

Document Type: Research Article

Publication date: September 1, 2002

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  • Published since 1954, this monthly journal contains new research in the field of microbiology including applied microbiology and biotechnology; microbial structure and function; fungi and other eucaryotic protists; infection and immunity; microbial ecology; physiology, metabolism and enzymology; and virology, genetics, and molecular biology. It also publishes review articles and notes on an occasional basis, contributed by recognized scientists worldwide.
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