Improved method for recovery of bacteriophage from large volumes of water using negatively charged microporous filters

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Abstract:

Current virus-recovery procedures using negatively charged microporous filters provide an inexpensive, reliable method for the recovery and detection of enteroviruses from water and wastewater; however, adjustment of the test samples to pH 3.5 to promote enterovirus adsorption results in significant inactivation of bacteriophage and an inability to simultaneously recover them from large volumes of water using this procedure. Procedures specifically designed for the detection of bacteriophage are currently in use but generally are only effective for small volumes of water. Positively charged filters can be used to recover both enteroviruses and bacteriophage from large volumes of water at neutral pH; however, the filters are expensive. The addition of manganese chloride to test solutions at pH 3.5 prior to filtration through negatively charged Filterite® filters allowed for sampling of larger volumes of water by reducing the inactivation of bacteriophage and increasing the recovery of PRD1, MS2, and naturally isolated bacteriophage by a factor of four or five when compared with recoveries from solutions without MnCl2. This method provides an inexpensive, reliable alternative to large-volume bacteriophage recovery procedures that use positively charged filters at neutral pH.Key words: bacteriophage, water, recovery, microporous filters.

Les méthodes courantes d'isolement des virus utilisant des filtres microporeux à charge négative demeurent une façon peu coûteuse et fiable pour détecter et isoler les entérovirus dans l'eau et dans les eaux usées. Par contre, pour augmenter l'adsorption des entérovirus, il faut ajuster à 3,5 le pH de l'échantillon à tester, ce qui entraîne une inactivation significative des bactériophages et il devient impossible d'isoler simultanément ces deux groupes de virus dans des gros volumes d'eau en utilisant cette méthode. Il existe actuellement des méthodes spécifiquement adaptées pour la détection des bactériophages mais règle générale, elles sont efficaces seulement avec des faibles volumes d'eau. Il est possible d'utiliser des filtres chargés positivement pour isoler simultanément les entérovirus et les bactériophages à partir de gros volumes d'eau à pH neutre mais, par contre, les filtres sont dispendieux. L'addition de chlorure de manganèse dans les échantillons ajustés à pH 3,5 avant la filtration avec des filtres Filterite® chargés négativement a permis de traiter adéquatement des plus gros volumes d'eau en diminuant l'inactivation des bactériophages et en augmentant l'isolement de PRD1, MS2 et des bactériophages isolés naturellement par un facteur de 4 à 5 comparativement à la récupération de ces virus dans les échantillons ne contenant pas de MnCl2. Cette méthode représente une alternative peu coûteuse et fiable comparativement aux méthodes suggérées utilisant des filtres à charge positive à pH neutre pour isoler des phages dans des gros volumes d'eau.Mots clés : bactériophage, l'eau, récupération, filtres microporeux.[Traduit par la Rédaction]

Keywords: bacteriophage; bactériophage; filtres microporeux; l'eau; microporous filters; recovery; récupération; water

Document Type: Research Article

Publication date: April 1, 2002

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  • Published since 1954, this monthly journal contains new research in the field of microbiology including applied microbiology and biotechnology; microbial structure and function; fungi and other eucaryotic protists; infection and immunity; microbial ecology; physiology, metabolism and enzymology; and virology, genetics, and molecular biology. It also publishes review articles and notes on an occasional basis, contributed by recognized scientists worldwide.
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