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Free Content Sleeping sickness diagnosis: use of buffy coats improves the sensitivity of the mini anion exchange centrifugation test

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Abstract:

Summary Objectives  To evaluate a modification of the mini anion exchange centrifugation test (mAECT) for the diagnosis of () human African trypanosomiasis (HAT). To increase its sensitivity, this test uses 350 μl of buffy coat withdrawn from 5 ml of blood instead of blood. Methods  The new protocol was first tested experimentally on serial dilution of trypanosomes and was then further evaluated under field conditions on 57 patients with HAT diagnosed during a medical survey in Guinea. Results  Experimentally, the use of buffy coats improved mAECT sensitivity at least five fold and enabled to consistently detect parasites in blood at a concentration of 10 trypanosomes/ml. During the field evaluation, more patients tested positive by mAECT-bc (96.5%) than by mAECT-blood (78.9%, χ = 6.93,  = 0.008) and lymph juice examination (77.2%, χ = 7.67,  = 0.005). Furthermore, the number of parasites per collectors was significantly higher (7.2 . 2.6,  = 0.001) when buffy coats were used instead of blood. Conclusion  The use of the mAECT-bc protocol enabled a significant improvement of HAT parasitological diagnosis in Guinea, without any additional costs. It would deserve to be tested in other endemic areas.

French
Objectifs: 

Evaluer une modification du test de la mini centrifugation àéchangeuse d’anion (mAECT) pour le diagnostic de la trypanosomiase humaine africaine (THA) àTrypanosoma brucei gambiense. Afin d’augmenter sa sensibilité, ce test utilise 350 μl de couenne leuco-plaquettaire (buffy-coat), prélevée sur 5 ml de sang au lieu de sang total. Méthodes: 

Le nouveau protocole a été testé sur des dilutions en série de trypanosomes et a ensuite étéévalué dans des conditions de terrain sur 57 patients THA diagnostiqués lors d’une enquête médicale en Guinée. Résultats: 

Expérimentalement, l’utilisation de ‘buffy coats’ a amélioré la sensibilité du test mAECT d’au moins cinq fois et a permis de détecter de façon consistante des parasites dans le sang à une concentration de 10 trypanosomes/ml. Au cours de l’évaluation sur le terrain, plus de patients ont été testés positifs par mAECT-bc (96,5%) que par mAECT-sang (78,9%; Chi2 = 6,93; p = 0,008) et l’examen du liquide lymphatique (77,2%; Chi2 = 7,67; p = 0,005). Le nombre de parasites par collecteur était significativement plus élevé (7,2 vs 2,6; p = 0,001) lorsque le ‘buffy coats’ plutôt que du sang étaient utilisé. Conclusion: 

L’utilisation du protocole mAECT-bc a permis une amélioration significative du diagnostic parasitologique de la THA en Guinée sans frais supplémentaires. Il mérite d’être testé sur Tb gambiense dans d’autres régions endémiques.

Keywords: Human African trypanosomiasis; Tripanosomiasis humana africana; buffy coat; capa leucocitaria; diagnosis; diagnostic; diagnóstico; mAECT; mini-anion exchange centrifugation technique (mAECT); trypanosomiase humaine africaine

Document Type: Research Article

DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-3156.2010.02546.x

Affiliations: 1:  Programme National de Lutte contre la Trypanosomose Humaine Africaine, Conakry, Guinée 2:  Centre International de Recherche-Développement sur l’Elevage en zone Sub-humide, Bobo-Dioulasso, Burkina Faso 3:  Institut Pierre Richet, Unité de Recherche ‘Trypanosomoses’, Abidjan, Côte d’Ivoire

Publication date: July 1, 2010

bsc/tmih/2010/00000015/00000007/art00003
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