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Free Content Cerebrospinal fluid B lymphocyte identification for diagnosis and follow-up in human African trypanosomiasis in the field

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Summary Objectives  In human African trypanosomiasis (HAT, sleeping sickness), staging of disease and treatment follow-up relies on white cell count in the cerebrospinal fluid (CSF). As B lymphocytes (CD19 positive cells) are not found in the CSF of healthy individuals but occur in neurological disorders such as multiple sclerosis, B lymphocyte count may be useful for field diagnosis/staging and therapeutic follow-up in HAT. Methods  Seventy-one HAT patients were diagnosed and 50 were followed-up 6–24 months after treatment. White cell counts were used for conventional staging (stage 1, ≤5 cells/μl CSF, =42; stage 2, ≥20 cells/μl, =16) and intermediate stage (6–19 cells/μl, =13). Slides containing 1 μl of CSF mixed with Dynabeads CD19 pan B were examined microscopically to detect B cell rosettes (bound to at least four beads). Results  Stage 1 patients exhibited zero (=37) or one CSF rosette/μl (=5), contrary to most stage 2 patients (14/16: ≥2 rosettes/μl). Intermediate stage patients expressed 0 (=9), 1 (=3) or 2 (=1) rosettes/μl of CSF. During follow-up, rosette counts correlated with white cell count staging but were much easier to read. Conclusion  B cell rosettes being easily detected in the CSF in field conditions may be proposed to replace white cell count for defining HAT stages 1 and 2 and limit uncertainty in treatment decision in patients with intermediate stage.


Dans la trypanosomiase humaine africaine (THA, maladie du sommeil), les stades de la maladie et le suivi du traitement s’appuient sur le nombre de globules blancs dans le liquide céphalo-rachidien (LCR). Comme les lymphocytes B (cellules CD19 positives) ne sont pas présents dans le LCR des individus en bonne santé mais surviennent dans les troubles neurologiques comme la sclérose en plaques, la numération des lymphocytes B pourrait être utile pour le diagnostic/classification sur le terrain et le suivi thérapeutique de la THA. Méthodes: 

71 patients HAT ont été diagnostiqués et 50 ont été suivis durant 12 à 24 mois après le traitement. La numération des globules blancs a été utilisée pour la classification classique (stade 1, ≤ 5 cellules/ml CSF, n = 42; stade 2, ≥ 20 cellules/ml, n = 16 et stade intermédiaire 6 à 19 cellules/ml, n = 13). Des lames contenant 1 ml de LCR mélangé avec du Dynabeads® pan B CD19 ont été examinées au microscope afin de détecter les rosettes de cellules B (liées à au moins 4 billes). Résultats: 

Les patients au stade 1 présentaient zéro (n = 37) ou une rosette/ml de LCR (n = 5), contrairement à la plupart des patients au stade 2 (14/16: ≥ 2 rosettes/ml). Les patients au stade intermédiaire exprimaient 0 (n = 10), 1 (n = 2) ou 2 (n = 1) Rosettes/ml de LCR. Au cours du suivi, le nombre des rosettes corrélait avec la teneur en globules blancs, mais étaient beaucoup plus facile à lire. Conclusion: 

Les rosettes de cellules B facilement détectées dans le LCR dans des conditions de terrain peuvent être proposées pour remplacer la numération des globules blancs pour définir les stades 1 et 2 de la THA et limiter l’incertitude dans la décision de traitement chez les patients au stade intermédiaire.
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Keywords: B lymphocytes; cerebrospinal fluid; classification; enfermedad del sueño; estadío; follow-up; human African trypanosomiasis; linfocitos B; liquide céphalo-rachidien; lymphocytes B; líquido cefalorraquídeo; maladie du sommeil; seguimiento; sleeping sickness; staging; suivi; tripanosomiasis humana Africana; trypanosomiase humaine africaine

Document Type: Research Article

Affiliations: 1:  Laboratory of Parasitology, EA 3174, Faculty of Medicine, University of Limoges, France 2:  Neurology Ward, University Hospital of Brazzaville, Republic of Congo 3:  Free Radicals Energy Substrates and Cerebral Physiopathology, EA 4170, Claude-Bernard Lyon 1 University, France 4:  National Control Programme for Human African Trypanosomiasis, Brazzaville, Republic of Congo 5:  UNICEF/UNDP/World Bank/WHO Special Programme for Research & Training in Tropical Diseases, Geneva, Switzerland 6:  Laboratory of Parasitology, Bordeaux 2 University, France

Publication date: 2010-04-01

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