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Free Content Cerebrospinal fluid B lymphocyte identification for diagnosis and follow-up in human African trypanosomiasis in the field

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Abstract:

Summary Objectives  In human African trypanosomiasis (HAT, sleeping sickness), staging of disease and treatment follow-up relies on white cell count in the cerebrospinal fluid (CSF). As B lymphocytes (CD19 positive cells) are not found in the CSF of healthy individuals but occur in neurological disorders such as multiple sclerosis, B lymphocyte count may be useful for field diagnosis/staging and therapeutic follow-up in HAT. Methods  Seventy-one HAT patients were diagnosed and 50 were followed-up 6–24 months after treatment. White cell counts were used for conventional staging (stage 1, ≤5 cells/μl CSF, =42; stage 2, ≥20 cells/μl, =16) and intermediate stage (6–19 cells/μl, =13). Slides containing 1 μl of CSF mixed with Dynabeads CD19 pan B were examined microscopically to detect B cell rosettes (bound to at least four beads). Results  Stage 1 patients exhibited zero (=37) or one CSF rosette/μl (=5), contrary to most stage 2 patients (14/16: ≥2 rosettes/μl). Intermediate stage patients expressed 0 (=9), 1 (=3) or 2 (=1) rosettes/μl of CSF. During follow-up, rosette counts correlated with white cell count staging but were much easier to read. Conclusion  B cell rosettes being easily detected in the CSF in field conditions may be proposed to replace white cell count for defining HAT stages 1 and 2 and limit uncertainty in treatment decision in patients with intermediate stage.

French
Objectifs: 

Dans la trypanosomiase humaine africaine (THA, maladie du sommeil), les stades de la maladie et le suivi du traitement s’appuient sur le nombre de globules blancs dans le liquide céphalo-rachidien (LCR). Comme les lymphocytes B (cellules CD19 positives) ne sont pas présents dans le LCR des individus en bonne santé mais surviennent dans les troubles neurologiques comme la sclérose en plaques, la numération des lymphocytes B pourrait être utile pour le diagnostic/classification sur le terrain et le suivi thérapeutique de la THA. Méthodes: 

71 patients HAT ont été diagnostiqués et 50 ont été suivis durant 12 à 24 mois après le traitement. La numération des globules blancs a été utilisée pour la classification classique (stade 1, ≤ 5 cellules/ml CSF, n = 42; stade 2, ≥ 20 cellules/ml, n = 16 et stade intermédiaire 6 à 19 cellules/ml, n = 13). Des lames contenant 1 ml de LCR mélangé avec du Dynabeads® pan B CD19 ont été examinées au microscope afin de détecter les rosettes de cellules B (liées à au moins 4 billes). Résultats: 

Les patients au stade 1 présentaient zéro (n = 37) ou une rosette/ml de LCR (n = 5), contrairement à la plupart des patients au stade 2 (14/16: ≥ 2 rosettes/ml). Les patients au stade intermédiaire exprimaient 0 (n = 10), 1 (n = 2) ou 2 (n = 1) Rosettes/ml de LCR. Au cours du suivi, le nombre des rosettes corrélait avec la teneur en globules blancs, mais étaient beaucoup plus facile à lire. Conclusion: 

Les rosettes de cellules B facilement détectées dans le LCR dans des conditions de terrain peuvent être proposées pour remplacer la numération des globules blancs pour définir les stades 1 et 2 de la THA et limiter l’incertitude dans la décision de traitement chez les patients au stade intermédiaire.

Keywords: B lymphocytes; cerebrospinal fluid; classification; enfermedad del sueño; estadío; follow-up; human African trypanosomiasis; linfocitos B; liquide céphalo-rachidien; lymphocytes B; líquido cefalorraquídeo; maladie du sommeil; seguimiento; sleeping sickness; staging; suivi; tripanosomiasis humana Africana; trypanosomiase humaine africaine

Document Type: Research Article

DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-3156.2009.02400.x

Affiliations: 1:  Laboratory of Parasitology, EA 3174, Faculty of Medicine, University of Limoges, France 2:  Neurology Ward, University Hospital of Brazzaville, Republic of Congo 3:  Free Radicals Energy Substrates and Cerebral Physiopathology, EA 4170, Claude-Bernard Lyon 1 University, France 4:  National Control Programme for Human African Trypanosomiasis, Brazzaville, Republic of Congo 5:  UNICEF/UNDP/World Bank/WHO Special Programme for Research & Training in Tropical Diseases, Geneva, Switzerland 6:  Laboratory of Parasitology, Bordeaux 2 University, France

Publication date: April 1, 2010

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