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Free Content Nested PCRs and sequencing of nuclear ITS-rDNA fragments detect three Leishmania species of gerbils in sandflies from Iranian foci of zoonotic cutaneous leishmaniasis

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Abstract:

Summary Objective  To identify and understand the natural transmission cycles of in Iranian sandflies. Method  Nested PCR protocols were developed to amplify two regions of the ribosomal RNA amplicon of (ITS1- gene, and a microsatellite DNA region of ITS2), which were species-specific by DNA sequence or fragment size. Results  The PCR assays detected in Iranian sandflies not only but also for the first time and , two other parasites of the great gerbil. All three parasites were found in the northeast and centre of Iran, in two foci of rural Zoonotic Cutaneous Leishmaniasis (ZCL) caused by . Fifty infections were detected in common sandfly species: at least six geographically differentiated haplotypes of in four to five sandfly species; one strain of in five to six sandfly species and one strain of in one sandfly species. Conclusion  Past conclusions about the transmission cycles of in Iran should be treated with caution. Careful molecular eco-epidemiological investigations are essential for modelling the roles of different sandfly species in maintaining and spreading ZCL foci. Even if non-pathogenic to humans, frequent inoculations of by sandflies might alter the efficacy of vaccines against . is probably the key vector in many ZCL foci because of its abundance and high infection rates with both and .

French
Objectif: 

Identifier et comprendre les cycles naturels de transmission du Leishmania chez les phlébotomes iraniens. Méthode: 

Des protocoles de PCR nestée ont été développés pour obtenir des amplicons dans deux régions de l’ARN ribosomal de Leishmania (la région du gène de l’ARNr ITS1-5.8S et une région d’ADN microsatellite de ITS2), avérées spécifiques d’espèce suite à la séquence d’ADN ou à la taille de fragment. Résultats: 

Les tests PCR ont détecté chez les phlébotomes iraniens non seulement Leishmania major, mais aussi pour la première fois, L. turanica et L. gerbilli sensu lato, deux autres parasites de la grande gerbille. Les trois parasites ont été retrouvés dans le nord-est et le centre de l’Iran, dans les deux foyers ruraux de zoonose à leishmaniose cutanée causée par L. major. 50 cas d’infection ont été détectés chez les espèces communes de phlébotomes: au moins 6 haplotypes géographiquement différents de L. major chez quatre à cinq espèces de phlébotomes, 1 souche de L. gerbilli s.l. chez cinq-six espèces de phlébotomes et 1 souche de L. turanica chez une espèce de phlébotome. Conclusion: 

Les conclusions précédentes sur les cycles la transmission de L. majeure en Iran devraient être considérées avec prudence. Des investigations moléculaires éco-épidémiologiques attentives sont essentielles pour la modélisation du rôle de différentes espèces de phlébotomes dans le maintien et la diffusion des foyers de zoonose à leishmaniose cutanée. Même si non pathogènes pour l’homme, les inoculations répétées de L. turanica par les phlébotomes sont susceptibles d’altérer l’efficacité de vaccins contre L. major. P. papatasi est probablement le vecteur essentiel dans beaucoup de foyers de zoonose à leishmaniose cutanée en raison de son abondance et de ses taux élevés d’infection par L. major et L. turanica.
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