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Free Content Laboratory diagnosis of pulmonary tuberculosis in TB and HIV endemic settings and the contribution of real time PCR for M. tuberculosis in bronchoalveolar lavage fluid

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Abstract:

Summary Background  Tuberculosis (TB) in Africa is increasing because of the human immunodeficiency virus (HIV) epidemic, and in HIV/AIDS patients it presents atypically. Pulmonary tuberculosis (PTB) in Africa is mainly diagnosed clinically, by chest radiograph or by sputum smear for acid fast bacilli (AFB). Methods  We evaluated in 120 HIV-infected patients with chest infection the diagnostic accuracy of AFB smear of sputum and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid, sputum (MTB) culture, real-time PCR and MycoDot serological test, using MTB culture of BAL fluid as gold standard. We correlated PCR cycle threshold values (C) to the culture results. Retrospectively, we evaluated the development of active TB in patients with positive PCR but negative culture. Results  Culture of BAL fluid identified 28 patients with PTB. Fifty-six patients could not produce adequate sputum. Sputum AFB smear and the serological test had sensitivities of 66.7% and 0%, respectively. PCR with C 40 was positive in 73 patients, 27 of whom were also TB culture positive (96.4% sensitivity and 52.3% specificity of PCR). PCR with C 32 had sensitivity of 85.7% and specificity of 90.9% to diagnose PTB in BAL. No patients with positive PCR but negative culture developed active TB during 18 months follow-up. Conclusion  In these HIV-infected patients, AFB smear and serology had very low sensitivities. PCR of BAL with C value 32 had improved specificity to diagnose active PTB. A prospective follow-up study is warranted in TB/HIV endemic settings, applying real time PCR to both sputum and BAL.

French
Données de base 

La tuberculose (TB) en Afrique est en augmentation à cause de l’épidémie VIH et chez les patients VIH/SIDA elle se présente atypiquement. La tuberculose pulmonaire (PTB) en Afrique est principalement diagnostiquée cliniquement par la radiographie de la poitrine ou par le frottis du crachat pour la recherche de bacilles acido-résistants (AFB). Méthodes 

Nous avons évalué chez 120 patients infectés par le VIH avec une infection des voies respiratoires, la précision du diagnostic par le frottis AFB du crachat et sur le lavage broncho alvéolaire (BAL), la culture de M. tuberculosis (MTB) à partir du crachat, la PCR en temps réel et le test sérologique MycoDot®, en utilisant la culture de MTB à partir du BAL comme gold standard. Nous avons corrélé les valeurs du nombre de cycles de la PCR (CT) avec les résultats de la culture. Rétrospectivement, nous avons évalué le développement de TB active chez les patients avec une PCR positive mais une culture négative. Résultats 

La culture du BAL a identifié 28 patients avec une PTB. 56 patients ne pouvaient pas produire de crachat adéquat. Le frottis AFB du crachat et le test sérologique avaient des sensibilités respectives de 66,7% et 0%. La PCR avec un CT de 40 était positive chez 73 patients dont 27 avec également une culture de TB positive (spécificité 96,4% et sensibilité 52,3% pour la PCR). La PCR avec un CT de 32 avait une sensibilité de 85,7% et une spécificité de 90,9% pour diagnostiquer la PTB à partir du BAL. Aucun patient avec une PCR positive mais une culture négative n’a développé de TB active au cours des 18 mois de suivi. Conclusion 

Chez ces patients infectés par le VIH, le frottis AFB et la sérologie avaient des sensibilités très faibles. La PCR sur le BAL avec une valeur de CT de 32 a amélioré la spécificité pour diagnostiquer la PTB active. Une étude de suivi prospective appliquant la PCR en temps réel sur le crachat et le BAL est recommandée dans les régions endémiques de TB/VIH.

Keywords: BAL; LBA; PCR a tiempo real; PCR en temps réel; branchoalveolar lavage; co-infection VIH/TB; coinfección por VIH/TB; diagnostic de laboratoire; diagnóstico laboratorio; frottis négatif; human immunodeficiency virus/tuberculosis co-infection; laboratory diagnosis; lámina negativa; real time PCR; sensibilidad; sensibilité; sensitivity; smear negative

Document Type: Research Article

DOI: https://doi.org/10.1111/j.1365-3156.2007.01907.x

Affiliations: 1:  Department of Internal Medicine, Kilimanjaro Christian Medical Centre, Moshi, Tanzania 2:  Laboratory for Medical Microbiology and Public Health, Enschede, The Netherlands 3:  Department of Internal Medicine, St Radboud University Medical Centre, Nijmegen, The Netherlands 4:  Department of Medical Microbiology and Infection Control, Gelre Hospitals, Apeldoorn, The Netherlands

Publication date: 2007-10-01

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